惠民福利国产精品午夜一级毛片精品_高清无码操逼免费观看的毛片_惠民福利国产又色又爽又黄的在线观看_91精品久久久久中文字幕_99免费视频在线_欧洲熟妇AV一级_日本不卡在线视频二区三区_嗯…啊摸湿奶头免费视频_国产精品免费观看无遮挡_少妇宾馆粉嫩10p

針對(duì)上述問(wèn)題，華中科技大學(xué)張志平教授等人合成了用于止血和傷口愈合且具有抗菌、抗氧化和強(qiáng)大濕粘附特性的原位超快自膠凝包衣粉末。這種粉末通過(guò)血液觸發(fā)的原位自凝膠化實(shí)現(xiàn)止血，迅速形成強(qiáng)粘附性水凝膠，密封傷口界面。這種機(jī)制在頸動(dòng)脈出血、肝出血和脾損傷的豬模型中顯示出強(qiáng)大的止血功效。此外，這種多功能凝膠還可用作局部藥物緩釋系統(tǒng)。將富含血小板的血漿（PRP，富含多種生長(zhǎng)因子）和凝膠粉末同時(shí)涂抹在傷口部位，凝膠粉末就能在原位轉(zhuǎn)化為富含多種生長(zhǎng)因子的生物活性凝膠（P@TCP-凝膠），從而實(shí)現(xiàn)生長(zhǎng)因子的持續(xù)釋放，并防止其被傷口中的酶迅速降解。同時(shí)，通過(guò)進(jìn)一步負(fù)載促進(jìn)血管生成的小分子藥物去鐵胺（DFO，DP@TCP-gel），其促進(jìn)傷口愈合的能力得到進(jìn)一步增強(qiáng)，在正常傷口、糖尿病慢性傷口和感染性傷口等各種傷口模型中都表現(xiàn)出卓越的促進(jìn)愈合能力。相關(guān)成果以In Situ Ultrafast Self-gelling Coacervate Powder with Antibacterial, Antioxidant, and Robust Wet Adhesion Properties for Hemostasis and Wound Healing為題于2025年4 月 7 日發(fā)表在 Advanced Functional Materials（DOI：10.1002/adfm.202502577）。

·

研究示意圖

（1）TCP 凝聚層水凝膠（TCP）的配方和形成

如圖 1B 所示，TA 對(duì)液 - 液分相過(guò)程至關(guān)重要，含 TA 的體系均觀察到沉淀，而 TA 和 CS 二元體系形成的凝聚層不均勻，TA 和 PEG 二元體系及 TCP 三元體系可形成均勻凝聚層，命名為 TP 和 TCP。如圖 1C、D 所示，TCP 的剪切模量和粘度明顯高于 TP，CS 的存在增強(qiáng)了凝聚層水凝膠內(nèi)部的內(nèi)聚力，降低了凝聚層的流動(dòng)性，提高了水凝膠的機(jī)械強(qiáng)度和粘附性。如圖 1E、F、G、H 所示，TCP 凝膠在宏觀粘附和拉伸實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出比 TP 更優(yōu)異的粘附性和拉伸性，能提起 500g 不銹鋼砝碼并密封塑料瓶出水口，其在豬皮上的粘附強(qiáng)度明顯高于 TP，平均爆破壓力也高于 TP 凝膠及正常血壓，這證實(shí)加入 CS 增強(qiáng)了凝膠的內(nèi)聚力和機(jī)械強(qiáng)度，從而提高了其粘附性。如圖 1I、J、K 所示，TCP 凝聚層水凝膠的形成過(guò)程為隨著時(shí)間推移形成越來(lái)越多不同大小的凝聚層液滴，逐漸相互靠近形成致密的液滴交聯(lián)結(jié)構(gòu)，CLSM 圖像和 SEM 圖像均顯示水凝膠內(nèi)存在圓形凝聚層液滴結(jié)構(gòu)。如圖 1L、M、N 所示，F(xiàn)TIR 光譜顯示 TCP 中沒有新峰出現(xiàn)，其模量受頻率影響，表明 TCP 主要是通過(guò)氫鍵和疏水相互作用等物理相互作用形成；凝聚層在 DMSO 中迅速被破壞，在 Tween 20 中逐漸被破壞，而在 NaCl 溶液和去離子水中長(zhǎng)時(shí)間保持完整，說(shuō)明氫鍵相互作用在 TCP 形成中起主導(dǎo)作用，其次是疏水相互作用，TA 中豐富的酚羥基作為主要的氫鍵供體，與 PEG 中的氧原子和 CS 中的氨基形成分子間氫鍵主導(dǎo)凝聚層形成，TA 苯環(huán)之間的疏水相互作用也促進(jìn)了凝聚過(guò)程。

圖1. TCP 共凝膠衍生凝膠的制備及形成機(jī)理。（A）制備過(guò)程及特性；（B）不同成分混合形成的共凝膠外觀；（C）共凝膠的 G′和 G″；（D）凝聚態(tài)粘度；（E）粘附力與拉伸性能照片；（F）舉起 500 克重物；（G）TP 和 TCP 在豬皮上的平均粘附強(qiáng)度（n=5）；（H）爆破壓力（n=3）；（I）形成過(guò)程的光學(xué)顯微鏡及照片圖像，箭頭指示沉淀的凝聚凝膠；（J）光學(xué)顯微鏡照片；（K）SEM 圖像；（L）FTIR 光譜；（M）TCP 在不同溶劑中的降解情況；（N）分子相互作用示意圖

（2）TCP 具有強(qiáng)大的粘附力和卓越的體內(nèi)止血能力

隨著剪切速率或溫度的增加，TCP 水凝膠的粘度逐漸降低，這是由于在剪切力或加熱作用下物理相互作用被破壞（圖 2A、B）。振蕩剪切測(cè)試證實(shí)了 TCP 的自愈合能力，在大氣和水下環(huán)境中，兩個(gè)單獨(dú)的水凝膠片段融合成一個(gè)完整的單元，進(jìn)一步證明了這一點(diǎn)。這種自愈合能力主要?dú)w因于水凝膠表面基團(tuán)之間形成的氫鍵（圖 2C-E）。此外，TCP 水凝膠在空氣中和水下均表現(xiàn)出優(yōu)異的粘附性，能緊密粘附在玻璃、金屬、塑料、橡膠和豬皮等各種材料表面（圖 2F）。這種強(qiáng)大的粘附力主要?dú)w因于水凝膠與各種底物之間形成的共價(jià)或非共價(jià)鍵相互作用。具體而言，TCP 水凝膠表面保留的鄰苯二酚基團(tuán)通過(guò)氫鍵、陽(yáng)離子 -π 相互作用、配位鍵、金屬螯合和 π-π 相互作用，有助于實(shí)現(xiàn)強(qiáng)大的粘附（圖 2G）。即使在流水沖洗 60 秒或在 PBS 溶液中浸泡 21 天后，TCP 水凝膠仍繼續(xù)與豬皮保持緊密粘附（圖 2I、J）。此外，TCP 能在包括大鼠心臟、腎臟、肝臟和脾臟在內(nèi)的各種離體組織上實(shí)現(xiàn)緊密粘附和牢固的切口閉合（圖 2K）。

失血過(guò)多是手術(shù)或創(chuàng)傷后導(dǎo)致死亡的主要原因，因此快速有效的止血策略至關(guān)重要。使用 18G 針頭在小鼠肝臟誘導(dǎo)出血，然后立即應(yīng)用 TCP 水凝膠。圖 2L-N 中的結(jié)果顯示，TCP 治療組在約 13 秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)止血，明顯短于未治療的對(duì)照組（約 120 秒）。此外，TCP 治療組的失血量約為 16.6mg，遠(yuǎn)低于對(duì)照組的約 50.2mg。同樣，TCP 水凝膠在小鼠斷尾模型中也表現(xiàn)出優(yōu)異的止血能力，應(yīng)用于出血部位后幾乎立即止血（圖 2O-Q）。

圖2.TCP 的粘合特性及體內(nèi)止血能力。（A）粘度曲線（剪切速率掃描）；（B）不同溫度下的粘度；（C）1%-500%剪切應(yīng)變循環(huán)下的 G′和 G″；（D）自愈能力示意圖；（E）自愈行為圖像（空氣/水下）；（F）TCP 水凝膠與多種基底的粘附性照片；（G）與不同基底的粘附機(jī)理；（H）與濕豬皮組織的緊密粘附；（I）持續(xù)水流下與豬皮膚的粘附；（J）長(zhǎng)期濕粘附特性；（K）體外組織粘附及切口閉合性能；（L-N）對(duì)小鼠肝臟出血模型的止血效果（n=3）；（O-Q）對(duì)小鼠斷尾模型的止血效果（n=3）

（3）TCP 凝聚層粉末可快速原位自凝膠化，具有強(qiáng)大的粘附力和長(zhǎng)期儲(chǔ)存穩(wěn)定性

TCP 粉末遇水可迅速重構(gòu)為 TCP-gel，這一過(guò)程在光學(xué)顯微鏡下也得到了直觀展示（圖 3A）。TCP 粉末遇水能迅速膨脹并相互連接形成塊狀水凝膠（圖 3B）。重新水化形成的 TCP 凝膠內(nèi)部保留了球形凝聚層結(jié)構(gòu)（圖 3C）。TCP 粉末和 CS 粉末因含大量親水基團(tuán)，在界面處表現(xiàn)出優(yōu)異親水性，能迅速吸收液體，且吸液能力顯著優(yōu)于 YNBY 粉末（圖 3D）。在吸血方面，TCP 粉末甚至超過(guò)了 CS 粉末，這可能與 TA 的存在使其能捕獲更多紅細(xì)胞有關(guān)（圖 3E）。TCP 粉末倒入 PBS 溶液或血液中時(shí)，會(huì)迅速吸收部分液體并自凝膠化，緊緊粘附在試管壁上形成屏障阻止液體流動(dòng)，而 YNBY 粉末和 CS 粉末缺乏此自凝膠化能力（圖 3F）。TCP 粉末易于粘附在濕組織上（圖 3G）。TCP 粉末涂抹在豬皮潮濕表面后迅速吸收界面水并在 30 秒內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z（圖 3H）。TCP 粉末吸收 FITC-BSA 溶液后原位轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色熒光水凝膠，與豬皮組織緊密粘附無(wú)間隙（圖 3I）。原位形成的 TCP 凝膠具有動(dòng)態(tài)粘附能力，能抵抗拉伸等外力（圖 3J）。TCP 粉末應(yīng)用于受損豬肚時(shí)可原位形成凝膠有效密封出水孔（圖 3K）。搭接剪切測(cè)試表明 TCP 凝膠在豬皮上的平均粘附強(qiáng)度顯著超過(guò)纖維蛋白密封劑（圖 3L）。

圖3. TCP 共凝膠衍生粉末的制備及快速膠凝化過(guò)程。（A）制備及快速凝膠化示意圖；（B）從粉末到塊狀水凝膠的轉(zhuǎn)變過(guò)程光學(xué)顯微鏡圖像；（C）TCP 凝膠的 SEM 圖像；（D）TCP 粉末與商用粉末的液體吸收照片；（E）液體吸收能力對(duì)比；（F）TCP 粉末在 PBS 和血液中的自膠凝效果（倒管法）；（G）吸收界面水并自膠化的示意圖；（H）TCP 粉末在濕豬皮表面的自膠化；（I）原位形成水凝膠并緊貼豬皮的顯微圖像；（J）形成的凝膠與豬皮緊密結(jié)合；（K）密封豬胃損傷的照片；（L）TCP 凝膠與纖維蛋白膠在豬皮膚上的粘附強(qiáng)度（n=5）；（M）TCP 凝膠的 G′、G″和粘度

（4）TCP 粉末相較于商業(yè)止血材料展現(xiàn)出更優(yōu)異的止血效果

TCP 粉末出色的吸液能力、自凝膠化特性以及強(qiáng)大的濕組織粘附性，表明其有望成為一種杰出的止血材料。如圖 4A - C 所示，TCP 粉末能在約 20 秒內(nèi)誘導(dǎo)重新激活的抗凝全血中形成穩(wěn)定的血栓，這明顯快于對(duì)照組（約 7.7 分鐘）、云南白藥組（約 3.7 分鐘）和殼聚糖組（約 3.3 分鐘 ）。此外，當(dāng)該材料與重新激活的抗凝全血共同孵育 1 分鐘時(shí)，TCP 粉末的凝血指數(shù)（BCI）約為 14.1%，遠(yuǎn)低于云南白藥組（約 28.2%）、殼聚糖組（約 29.0%）和對(duì)照組（約 86.9%）（圖 4D）。隨后，利用大鼠肝出血和股動(dòng)脈出血模型評(píng)估 TCP 粉末的體內(nèi)止血效果。除云南白藥和殼聚糖粉末外，臨床上常用的明膠海綿也被用作對(duì)照。如圖 4E - H 所示，在由手術(shù)刀造成的大鼠肝出血模型中，由于出血迅速且量大，云南白藥粉末和殼聚糖粉末因缺乏自凝膠化能力和有限的吸血能力，幾乎沒有止血效果。相比之下，TCP 粉末具有出色的吸血和自凝膠化特性，它迅速吸收血液并原位轉(zhuǎn)化為具有強(qiáng)粘附性的 TCP 凝膠，有效封閉出血部位，展現(xiàn)出最佳的止血性能。臨床上常用的明膠海綿在該模型中也顯示出一定的止血效果。如圖 4I - L 所示，在大鼠股動(dòng)脈出血模型中，TCP 粉末仍然表現(xiàn)出最佳的止血效果，在約 10 秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)止血，失血量?jī)H約 16 mg，明顯少于對(duì)照組約 649 mg 的失血量。上述結(jié)果充分證明，自凝膠化的 TCP 粉末是一種極具前景的止血材料。

圖4. TCP 粉末的體內(nèi)外止血能力。（A）體外凝血時(shí)間示意圖；（B）TCP 粉末處理大鼠全血的凝血照片；（C）TCP 粉末處理的凝血時(shí)間（n=3），商用粉末（YNBY 粉和 CS 粉）作為對(duì)照；（D）TCP 粉末組和對(duì)照組的 BCI（n=3）；（E）大鼠肝臟出血及 TCP 粉末止血示意圖；（F）TCP 粉末止血的大鼠肝臟照片；（G, H）肝臟出血模型的止血時(shí)間和失血量分析（n=3）；（I）大鼠股動(dòng)脈出血及 TCP 粉末止血示意圖；（J）TCP 粉末止血的股動(dòng)脈模型照片；（K, L）股動(dòng)脈出血模型的止血時(shí)間和失血量分析（n=3）

（5）TCP 粉末在豬模型中的止血驗(yàn)證

為了進(jìn)一步評(píng)估 TCP 粉末的體內(nèi)止血效果，并驗(yàn)證其臨床應(yīng)用潛力，在豬嚴(yán)重出血模型中進(jìn)行了臨床前功能評(píng)估。如圖 5A 所示，用 2mm 的針頭在豬頸動(dòng)脈上制造出血傷口，然后立即應(yīng)用 1g TCP 粉末或商業(yè)殼聚糖粉末。圖 5B 中的結(jié)果表明，殼聚糖粉末未能實(shí)現(xiàn)有效止血，在水沖洗后迅速崩解。相比之下，TCP 粉末吸收血液并粘附在傷口部位，實(shí)現(xiàn)了快速止血。用水沖洗后，可以觀察到 TCP 粉末完全轉(zhuǎn)化為具有強(qiáng)大濕粘附性的凝膠，保持緊密的界面結(jié)合，沒有二次出血（支持信息視頻 S15）。在豬內(nèi)臟器官出血模型中進(jìn)行了進(jìn)一步的臨床前評(píng)估。在豬肝和脾臟上通過(guò)手術(shù)制造線性缺損（長(zhǎng) 15mm× 深 10mm）（圖 5C）。觀察到傷口處有活動(dòng)性出血后，立即應(yīng)用 3g TCP 粉末或商業(yè)殼聚糖粉末。TCP 粉末在應(yīng)用后 2 分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)了出血控制。用水沖洗后，TCP 粉末形成的凝膠緊密粘附在肝臟或脾臟組織上，有效封閉了出血部位（圖 5D、E）。相比之下，雖然殼聚糖粉末在肝臟模型中顯示出暫時(shí)的止血效果，但沖洗會(huì)破壞其血凝塊，導(dǎo)致再次出血（圖 5D）。這些發(fā)現(xiàn)證實(shí)了 TCP 粉末卓越的粘附性能和止血效果，突出了其在處理動(dòng)脈出血和不可壓縮的內(nèi)臟器官損傷方面的臨床應(yīng)用潛力。

圖5. TCP 粉末在豬模型中的止血驗(yàn)證。（A）豬頸動(dòng)脈出血模型示意圖；（B）TCP 粉末和 CS 粉末在豬頸動(dòng)脈出血模型中的止血過(guò)程；（C）豬肝和脾出血模型示意圖；（D）TCP 粉末和 CS 粉末在豬肝臟出血模型中的止血過(guò)程；（E）TCP 粉末在豬脾臟出血模型中的止血過(guò)程

（6）與富血小板血漿（PRP）和去鐵胺（DFO）協(xié)同作用，DP@TCP 凝膠展現(xiàn)出優(yōu)異的生物活性

TCP 粉末的自凝膠化特性使其具有作為傷口敷料材料的潛力，但單獨(dú)的 TCP 粉末生物活性不顯著，可能會(huì)限制其促進(jìn)傷口愈合的能力。PRP 因富含多種生長(zhǎng)因子在傷口愈合領(lǐng)域受到重視，將 TCP 粉末與含有 DFO 的 PRP 溶液混合制備 DP@TCP 凝膠（圖 6A）。研究確定了有效負(fù)載 50μL PRP 所需的 TCP 量，且對(duì) DFO 的封裝效率可達(dá)約 80%。DP@TCP 凝膠在 72 小時(shí)內(nèi)實(shí)現(xiàn)了 DFO 和 PRP 中總蛋白質(zhì)的持續(xù)釋放（圖 6B），這主要?dú)w因于 TA 的羥基與 DFO 中的酰胺鍵以及蛋白質(zhì)中的肽鍵形成氫鍵的能力，這種局部持續(xù)遞送特性有利于確保 PRP 的療效，并避免因 DFO 局部濃度過(guò)高而產(chǎn)生的副作用。檢測(cè)結(jié)果表明，TCP 凝膠與人類臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）和小鼠成纖維細(xì)胞（L929）均具有良好的細(xì)胞相容性，并且 TCP 凝膠的溶血特性幾乎可以忽略不計(jì)（圖 6C - F），在溶血實(shí)驗(yàn)中，TCP 凝膠處理組上清液在 570nm 處的吸光度計(jì)算得出的溶血率顯著低于 PBS 組，這可能是由于 TA 和 CS 對(duì)紅細(xì)胞的吸附作用。在研究不同載藥水凝膠促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移和血管生成能力的實(shí)驗(yàn)中，由于 PRP 中富含生長(zhǎng)因子，負(fù)載 PRP 的 TCP 凝膠組（P@TCP 凝膠）、同時(shí)負(fù)載 DFO 和 PRP 的 TCP 凝膠組（DP@TCP 凝膠）以及 DFO 和 PRP 混合溶液組（DP）在促進(jìn) L929 細(xì)胞增殖方面表現(xiàn)出相當(dāng)?shù)哪芰Γ▓D 6G）。在劃痕實(shí)驗(yàn)和管形成實(shí)驗(yàn)中，DP@TCP 凝膠在所有凝膠組中表現(xiàn)出最佳的促遷移和促管形成能力，與 DP 組相當(dāng)（圖 6H - M），這表明 DFO 和 PRP 的組合賦予了凝膠敷料最佳的生物活性，且 TCP 凝膠載體對(duì) DFO 和 PRP 的生物活性沒有顯著影響。

圖6. DP@TCP 凝膠的制備及生物活性研究。（A）TCP 粉末衍生生物活性水凝膠的制備示意圖；（B）DFO 和 PRP 的釋放曲線（n=3）；（C）不同濃度 TCP 凝膠提取物處理 HUVEC 的細(xì)胞活力（n=6）；（D）處理 L929 的細(xì)胞活力（n=6）；（E）L929 細(xì)胞的活/死染色；（F）TCP-gel 的溶血率及 RBC 上清液成像（n=3）；（G）L929 細(xì)胞增殖率（n=6）；（H）不同凝膠處理的 L929 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)圖像；（I）劃痕實(shí)驗(yàn)中傷口閉合率分析（n=3）；（J）不同凝膠處理的 HUVEC 細(xì)胞管形成圖像；（K-M）管形成試驗(yàn)中網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)、節(jié)點(diǎn)和相對(duì)管長(zhǎng)度分析（n=3）

（7）利用 TCP 固有的抗菌和抗氧化特性，DP@TCP 凝膠展現(xiàn)出出色的抗菌和抗氧化功能

實(shí)驗(yàn)研究了 TCP 凝膠的抗菌效果，結(jié)果表明 0.5mg/mL 的 TCP 凝膠提取物展現(xiàn)出良好的抗菌性能，而當(dāng)濃度提升至 1mg/mL 時(shí)，對(duì)兩種細(xì)菌的抑制率接近 100%（圖 7A-D）。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了 1mg/mL 的各種載藥凝膠提取物的抗菌效果，結(jié)果顯示所有 TCP 凝膠組對(duì)細(xì)菌的抑制率均接近 100%。DP 組也顯示出一定的抗菌效果，這主要?dú)w因于 PRP 中存在的抗菌物質(zhì)，如血小板活化因子（PAF）、血小板因子 4（PF4）、人 β - 防御素 - 3（HBD - 3）和巨噬細(xì)胞炎性蛋白（MIP - 1α）等（圖 7E-G）。實(shí)驗(yàn)評(píng)估了 TCP 凝膠的抗氧化能力，在 ABTS + 自由基清除實(shí)驗(yàn)中，10μg/mL 的 TCP 凝膠提取物對(duì) ABTS + 自由基的清除率達(dá)到 100%，藥物的負(fù)載并未顯著影響 TCP 凝膠的抗氧化能力（圖 7H-K）。DPPH?自由基清除實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也呈現(xiàn)出類似的趨勢(shì)，充分證明了 TCP 凝膠出色的抗氧化能力（圖 7L-O）。此外，細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)研究了 TCP 凝膠對(duì)經(jīng) H?O?處理的 HUVEC 或 L929 細(xì)胞的保護(hù)作用。結(jié)果顯示，經(jīng) H?O?處理后細(xì)胞活力顯著下降，但在同時(shí)用 H?O?和 TCP 凝膠提取物處理的組中，細(xì)胞活力明顯高于僅用 H?O?處理的細(xì)胞。當(dāng)凝膠提取物的濃度達(dá)到 20μg/mL 時(shí)，L929 細(xì)胞的活力與未處理的正常細(xì)胞相當(dāng)，表明 TCP 凝膠可以有效保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷（圖 7P、R）。

圖7. 多功能 TCP 凝膠的抗菌和抗氧化特性。（A）抗菌效果示意圖；（B）TCP 凝膠提取物處理后的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌菌落照片；（C, D）相應(yīng)細(xì)菌的相對(duì)存活率（n=3）；（E）不同水凝膠處理后的菌落照片；（F, G）相應(yīng)細(xì)菌的相對(duì)存活率（n=3）；（H, I）基于 ABTS 法的 TCP 凝膠提取物抗氧化活性（n=3）；（J, K）基于 ABTS 法的不同凝膠提取物抗氧化活性（n=3）；（L, M）基于 DPPH 法的 TCP 凝膠提取物抗氧化活性（n=3）；（N, O）基于 DPPH 法的不同凝膠提取物抗氧化活性（n=3）；（P）TCP 凝膠在氧化應(yīng)激下保護(hù)細(xì)胞活性的示意圖；（Q）不同凝膠提取物對(duì) H?O? 處理的 HUVEC 的細(xì)胞保護(hù)作用（n=6）；（R）對(duì) H?O? 處理的 L929 細(xì)胞的細(xì)胞保護(hù)作用（n=6）

（8）多功能 DP@TCP 凝膠加速慢性傷口愈合

糖尿病是導(dǎo)致難愈合慢性傷口的主要原因之一，其關(guān)鍵在于傷口部位血管再生的障礙。為此，研究利用糖尿病大鼠全層皮膚缺損模型，評(píng)估 DP@TCP 凝膠對(duì)慢性傷口愈合的促進(jìn)作用。結(jié)果顯示，DP@TCP 凝膠顯著加速傷口愈合，在第 9 天愈合率約為 90.5%，遠(yuǎn)高于對(duì)照組的 52.9%；到第 12 天，愈合率接近 97.7%，優(yōu)于其他處理組（圖 8B - D）。H&E 染色表明，第 6 天傷口形成明顯肉芽組織，第 12 天 DP@TCP 凝膠組傷口幾乎完全閉合，且皮膚附屬器再生良好（圖 8E）。Masson 染色顯示，DP@TCP 凝膠組傷口部位膠原蛋白沉積顯著增加，且第 12 天膠原纖維更加成熟，排列規(guī)則（圖 8F - H）。

進(jìn)一步分析其機(jī)制發(fā)現(xiàn)，糖尿病傷口愈合障礙主要源于高糖環(huán)境中 HIF - 1α 穩(wěn)定性受損，導(dǎo)致血管生成紊亂。免疫組織化學(xué)（IHC）檢測(cè)顯示，第 6 天對(duì)照組和 TCP 凝膠組 HIF - 1α 表達(dá)水平低，而載藥水凝膠組（尤其是 DP@TCP 和 DP 組）表達(dá)顯著增加，這主要?dú)w因于 DFO 穩(wěn)定 HIF - 1α 的能力（圖 8I、J）。到第 15 天，DP@TCP 和 DP 組 HIF - 1α 表達(dá)下降，可能是由于身體自我調(diào)節(jié)機(jī)制的作用。免疫熒光（IF）分析表明，第 6 天 DP@TCP 凝膠組血管再生最顯著，這歸因于 DFO 穩(wěn)定 HIF - 1α 以及 DP@TCP 凝膠釋放 VEGF 等生長(zhǎng)因子的雙重作用（圖 8K）。到第 12 天，該組血管數(shù)量減少，這是由于傷口進(jìn)入重塑期，不成熟血管逐漸退化。

圖8. DP@TCP 凝膠加速糖尿病大鼠全厚皮膚缺損模型的傷口愈合。（A）傷口及治療方案示意圖；（B）傷口愈合過(guò)程照片；（C）傷口愈合率（n=4）；（D）傷口區(qū)域示意圖；（E）第 6 天和第 12 天傷口切片的 H&E 染色圖像；（F）第 6 天和第 12 天傷口切片的 Masson 三色染色圖像；（G, H）第 6 天和第 12 天傷口膠原沉積分析（n=3）；（I）HIF-1α 的 IHC 染色；（J）第 6 天 HIF-1α IHC 染色分析（n=3）；（K）α-SMA 和 CD31 的 IF 共染色

（9）多功能 DP@TCP 凝膠加速慢性傷口愈合

DP@TCP 凝膠在體外表現(xiàn)出優(yōu)異的抗菌、抗氧化和血管再生能力，因此進(jìn)一步研究了其在感染傷口模型中的促愈合能力。實(shí)驗(yàn)在正常大鼠背部構(gòu)建了金黃色葡萄球菌感染的傷口模型，并進(jìn)行各種處理。結(jié)果顯示，DP@TCP 凝膠在促進(jìn)感染傷口愈合方面效果最佳，其次是 DP 組，TCP 凝膠也表現(xiàn)出一定的促愈合效果（圖 9B - D）。在治療后的第 3 天和第 12 天，從傷口部位收集肉芽組織提取細(xì)菌并進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)。結(jié)果顯示，在第 3 天，DP@TCP 凝膠和 TCP 凝膠顯著抑制了傷口部位的細(xì)菌生長(zhǎng)，相對(duì)細(xì)菌計(jì)數(shù)均小于 1%；在第 12 天，DP@TCP 凝膠組的傷口部位幾乎沒有細(xì)菌生長(zhǎng)（圖 9E - G）。H&E 染色結(jié)果顯示，DP@TCP 凝膠組的表皮完整，上皮層較薄，且有大量皮膚附屬器再生（圖 9H）。Masson 染色結(jié)果表明，在第 6 天，DP@TCP 凝膠組的膠原纖維沉積比其他組更多；在第 12 天，DP@TCP 凝膠組和 DP 組均有豐富且致密的膠原纖維，排列有序，而其他組的膠原纖維較少且排列紊亂（圖 9I - J）。這些結(jié)果表明，多功能 TCP 粉末由于其固有的抗菌和抗氧化特性，與生物活性物質(zhì)（如 PRP、DFO）結(jié)合時(shí)，可成為傷口修復(fù)領(lǐng)域極具前景的水凝膠敷料。

圖9. DP@TCP 凝膠加速金黃色葡萄球菌感染大鼠全厚皮膚缺損模型的傷口愈合。（A）傷口及治療方案示意圖；（B）傷口愈合過(guò)程照片；（C）傷口面積示意圖；（D）傷口愈合率（n=3）；（E）第 3 天和第 12 天傷口處細(xì)菌生長(zhǎng)情況（展平板法）；（F, G）傷口細(xì)菌數(shù)量及相對(duì)細(xì)菌數(shù)量分析（n=3）；（H）第 6 天和第 12 天傷口切片的 H&E 染色圖像；（I）第 6 天和第 12 天傷口切片的 Masson 三色染色圖像；（J）第 6 天和第 12 天傷口膠原沉積分析（n=3）