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針對(duì)上述問(wèn)題，武漢紡織大學(xué)楊紅軍、武漢大學(xué)中南醫(yī)院張冬、喻愛(ài)喜團(tuán)隊(duì)合作開(kāi)發(fā)了一種可注射的治療性水凝膠（MSL@Z/G），用于對(duì)抗氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)并促進(jìn)糖尿病皮瓣手術(shù)后潛在區(qū)域的血管生成。該系統(tǒng)通過(guò)將L-精氨酸（L-Arg）修飾于ZIF-90上并負(fù)載鍶離子（Sr2?），形成Sr-L-Arg@ZIF-90（SL@Z）納米顆粒，隨后封裝二甲雙胍（Metformin），得到MSL@Z納米顆粒，并摻入GelMA水凝膠基質(zhì)。注射至皮瓣術(shù)區(qū)后，水凝膠經(jīng)紫外交聯(lián)快速凝膠化，實(shí)現(xiàn)藥物、離子和氣體的聯(lián)合遞送。MSL@Z具備ROS響應(yīng)特性，在高氧化環(huán)境中可持續(xù)釋放NO并清除H?O?，修復(fù)因糖尿病導(dǎo)致的內(nèi)源性NO缺陷，同時(shí)鍶離子和二甲雙胍協(xié)同促進(jìn)Choke區(qū)血管新生、降低ROS水平并抑制NF-κB通路，從而提高皮瓣潛在區(qū)的血供與成活率。該多功能水凝膠在糖尿病多區(qū)域穿支皮瓣治療中展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。該文章于2025年4月5日以《ROS-Responsive Hydrogel Enables Drug/Ion/Gas Co-Delivery for Improving Survival of Multi-Territory Perforator Flap in Diabetes》為題發(fā)表于《Advanced Functional Materials》上（DOI：10.1002/adfm.202500586）。

研究示意圖

（1）SL@Z納米粒子的合成與表征

Sr-L-Arg@ZIF-90（記為SL@Z）納米粒子通過(guò)三步工藝合成：首先，咪唑-2-甲醛（2-ICA）和Zn(CH3COO)2·2H2O反應(yīng)生成ZIF-90；接著，將L-Arg的氨基與ZIF-90的醛基偶聯(lián)，得到L-Arg@ZIF-90（記為L(zhǎng)@Z）；最后，將Sr離子添加到L@Z中并與L-Arg的羧基反應(yīng)，得到SL@Z（圖1A）。X射線衍射（XRD）圖譜表明，ZIF-90骨架在用L-Arg修飾后保持穩(wěn)定，且Sr離子修飾后其結(jié)構(gòu)完整性未顯著改變（圖1B）。傅里葉變換紅外光譜（FT-IR）顯示，L@Z光譜中出現(xiàn)了一個(gè)新的吸收帶，對(duì)應(yīng)于L-Arg的C═N伸縮振動(dòng)，表明L-Arg成功接枝到ZIF-90上，接枝率為79.4%（圖1C）。Zeta電位測(cè)試顯示，L-Arg接枝后顯著提高了ZIF-90的表面電荷密度，Sr離子的加入則部分中和了表面正電荷，使zeta電位略有下降，但SL@Z仍保留足夠正電荷以促進(jìn)與細(xì)胞膜的相互作用（圖1D）。掃描電子顯微鏡（SEM）圖像顯示，ZIF-90的形貌在改性后基本保持不變，SL@Z的SEM粒徑較小且均勻，但水合粒徑較大（圖1E）。元素映射和能量色散X射線光譜（EDS）證實(shí)了SL@Z中C、O、N、Zn和Sr的均勻分布，表明L-Arg和Sr離子成功修飾（圖1F、G）。

圖1. SL@Z納米粒子的表征。A) 合成SL@Z納米粒子的示意圖。B) XRD圖譜，C) FT-IR圖譜，D) Zeta電位圖譜，以及E) ZIF-90、L@Z和SL@Z納米粒子的SEM圖像。比例尺：2 μm。F) SL@Z納米粒子元素映射的合并圖像和G) SL@Z納米粒子元素映射的分割圖像

（2）SL@Z納米粒子和MSL@Z/G水凝膠的制備與表征

如圖2A所示，通過(guò)將二甲雙胍封裝于SL@Z中制備MSL@Z納米粒子，并將其添加到GelMA中形成MSL@Z/G水凝膠。圖2B顯示，MSL@Z/G溶液呈淡黃色，而純GelMA溶液呈透明白色，且兩者均能在紫外線照射后固化。圖2C表明，SL@Z/G水凝膠的孔徑較小且均勻，表明SL@Z的添加增強(qiáng)了交聯(lián)效果；而MSL@Z/G的孔徑與SL@Z/G相當(dāng)，說(shuō)明二甲雙胍的添加對(duì)孔徑無(wú)顯著影響。圖2D、E顯示，元素譜圖中C和O分布于整個(gè)水凝膠中，而Zn和Sr的濃度較低，這歸因于SL@Z的添加量有限。圖2F、G的流變學(xué)測(cè)試表明，SL@Z/G和MSL@Z/G的能量?jī)?chǔ)存模量（G′）明顯高于純GelMA水凝膠，且SL@Z和MSL@Z的加入提高了水凝膠的抗變形能力，從而增強(qiáng)了其機(jī)械性能。圖2H的壓縮性能測(cè)試顯示，SL@Z/G和MSL@Z/G的抗壓強(qiáng)度高于純GelMA水凝膠，但二甲雙胍的引入對(duì)機(jī)械性能無(wú)顯著影響。圖2I的溶脹和降解動(dòng)力學(xué)測(cè)試表明，SL@Z和MSL@Z的加入降低了水凝膠的溶脹能力和降解速度，這歸因于納米粒子對(duì)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的影響。圖2J顯示，MSL@Z/G在6天內(nèi)釋放的二甲雙胍量為0.136 mg/ mL，表現(xiàn)出快速初始釋放和隨后的穩(wěn)定釋放階段，使其成為糖尿病多區(qū)域穿支皮瓣的理想遞送系統(tǒng)。圖2K的體外釋放曲線表明，Zn和Sr離子在前24小時(shí)內(nèi)快速釋放，隨后緩慢增加，到第7天，累積濃度分別為10.23 μg/ mL（Zn）和0.71 μg/ mL（Sr），這些濃度低于細(xì)胞毒性水平，且Sr離子濃度足以促進(jìn)血管生成和抗炎。綜上所述，MSL@Z/G水凝膠具有良好的機(jī)械性能，可作為二甲雙胍、Sr和L-Arg的共遞送系統(tǒng)，為糖尿病患者多區(qū)域穿支皮瓣的存活提供了新的選擇。

圖2. SL@Z 納米粒子和 MSL@Z/G 水凝膠的表征。A) 合成 a) MSL@Z 納米粒子、b) GelMA 和 c) MSL@Z/G 水凝膠的示意圖。B) MSL@Z/G 水凝膠凝膠化前后的照片。C) SEM 圖像顯示 GelMA、SL@Z/G、MSL@Z/G 水凝膠的微觀結(jié)構(gòu)。比例尺：500 μm。D) MSL@Z/G 水凝膠元素映射的分割圖像和 E) 合并圖像。比例尺：200 μm。F) 頻率掃描流變學(xué)、G) 振幅掃描流變學(xué)、H) 應(yīng)力-應(yīng)變曲線和 I) GelMA、SL@Z/G、MSL@Z/G 水凝膠的溶脹曲線。J) MSL@Z/G 水凝膠中二甲雙胍的累積釋放曲線。 K）MSL@Z/G水凝膠中Zn和Sr離子的釋放

（3）MSL@Z/G水凝膠在氧化損傷下誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS清除和抗凋亡活性

為了確定細(xì)胞環(huán)境中的H?O?是否能引發(fā)L-精氨酸釋放NO，利用DAF-FM DA熒光探針評(píng)估NO的積累，結(jié)果顯示在沒(méi)有H?O?時(shí)，DAF-FM熒光亮度最低，表明L-精氨酸在正常細(xì)胞環(huán)境中穩(wěn)定存在；加入H?O?后，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）和RAW264.7細(xì)胞發(fā)射DAF-FM熒光，且熒光強(qiáng)度隨H?O?濃度升高而呈劑量依賴(lài)性增加（圖3A），表明ROS能夠激活細(xì)胞環(huán)境中的MSL@Z納米粒子，導(dǎo)致L-Arg的釋放，進(jìn)而產(chǎn)生NO。DCFH-DA和DHE熒光探針評(píng)估結(jié)果表明，與100 μm H?O?處理相比，400 μm H?O?處理誘導(dǎo)的綠色和紅色熒光強(qiáng)度更強(qiáng)，表明細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生增加；與對(duì)照組相比，SL@Z/G和MSL@Z/G組的ROS表達(dá)顯著減少（熒光較弱），這主要?dú)w因于L-Arg釋放的NO，且MSL@Z/G組的ROS水平在所有組中最低，可能歸因于二甲雙胍的保護(hù)作用（圖3B、F）。線粒體膜電位測(cè)定結(jié)果顯示，細(xì)胞暴露于H?O?導(dǎo)致線粒體膜電位（MMP）耗散，綠色熒光增強(qiáng)，而經(jīng)MSL@Z/G組處理的細(xì)胞線粒體完整性顯著保留，紅色熒光明顯，綠色熒光微弱（圖3C、G）。Annexin V/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示，與陽(yáng)性對(duì)照組相比，MSL@Z/G組細(xì)胞凋亡明顯減少，提示二甲雙胍可能對(duì)氧化應(yīng)激細(xì)胞的凋亡具有保護(hù)作用；SL@Z/G組的細(xì)胞凋亡率也明顯低于陽(yáng)性對(duì)照，說(shuō)明NO對(duì)400 μm H?O?誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡也能發(fā)揮明顯的抑制作用（圖3D、F）。QT-PCR檢測(cè)結(jié)果表明，SL@Z/G和MSL@Z/G處理均能減輕caspase依賴(lài)的凋亡途徑的激活（圖3I）。簡(jiǎn)而言之，這些數(shù)據(jù)表明二甲雙胍/NO輸送可以降低ROS水平，維持線粒體完整性，并抑制細(xì)胞凋亡（圖3E）。

圖3. MSL@Z/G 水凝膠的體外抗氧化和抗凋亡作用。A) HUVEC 對(duì) MSL@Z/G 的細(xì)胞攝取以及 H2O2刺激下 NO 的釋放。B) 用不同水凝膠和 100 或 400 μм H2O2培養(yǎng)12 小時(shí)后 HUVEC 的 ROS 染色（DCFH-DA 探針，綠色）。C) 用不同水凝膠和 400 μм H2O2培養(yǎng) 12 小時(shí)后 HUVEC 的 JC-1 聚集體（紅色）和 JC-1 單體（綠色）染色。陰性組無(wú)H2O2 ，陽(yáng)性組有400 μм H2O2。 D）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HUVECs與不同水凝膠及400 μм H2O2培養(yǎng)12小時(shí)后凋亡情況的代表性圖。陰性組不加H2O2，陽(yáng)性組有400 μм H2O2。E）MSL@Z/G水凝膠誘導(dǎo)HUVECs清除ROS示意圖。F）基于DCFH-DA染色定量水凝膠的ROS清除能力。G）JC-1染色定量聚集體/單體熒光強(qiáng)度比。H）凋亡細(xì)胞定量，包括早期凋亡細(xì)胞（AnnexinV + PI ?）和晚期凋亡細(xì)胞（AnnexinV + PI +）。 (I) 用水凝膠和 400 μм H2O2處理12 小時(shí)后 HUVEC 中凋亡基因 Bax、Bcl-2 和 Caspase 的相對(duì) mRNA 表達(dá)

（4）MSL@Z/G水凝膠的抗炎作用

為了研究MSL@Z/G水凝膠的體外抗炎作用，通過(guò)用LPS處理RAW264.7巨噬細(xì)胞并建立M1表型極化模型（圖4A）。免疫熒光染色結(jié)果顯示，對(duì)照組細(xì)胞呈現(xiàn)圓形巨噬細(xì)胞形態(tài)和清晰的CD86熒光，而MSL@Z/G組的巨噬細(xì)胞呈現(xiàn)長(zhǎng)梭形形態(tài)，細(xì)胞伸長(zhǎng)率是Z/G組的1.95倍，且CD86熒光強(qiáng)度降低，CD206熒光強(qiáng)度升高，表明巨噬細(xì)胞可能從M1型復(fù)極化為M2型（圖4B、F）。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，對(duì)照組中M1和M2型巨噬細(xì)胞比例分別為26.63% ± 1.36%和1.68% ± 1.45%，而MSL@Z/G組M1巨噬細(xì)胞比例顯著降低（8.33% ± 0.67%），M2巨噬細(xì)胞數(shù)量顯著增加（18.53% ± 1.93%）（圖4C、G）。mRNA表達(dá)和細(xì)胞因子分泌結(jié)果表明，MSL@Z/G組炎癥細(xì)胞因子基因表達(dá)顯著下調(diào)，抗炎細(xì)胞因子產(chǎn)生顯著增強(qiáng)，且細(xì)胞因子分泌結(jié)果與mRNA表達(dá)一致（圖4D、F、H、I）。這表明MSL@Z/G水凝膠的ROS清除特性削弱了有害的促炎作用并促進(jìn)了M2表型極化，有助于健康的內(nèi)皮功能。

圖4. MSL@Z/G水凝膠調(diào)控巨噬細(xì)胞炎癥和極化。A) MSL@Z/G水凝膠誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化對(duì)免疫微環(huán)境平衡的影響示意圖。B) 用不同水凝膠培養(yǎng)第2天的RAW264.7細(xì)胞（LPS刺激后）的細(xì)胞核（藍(lán)色）、CD86（紅色）和CD206（綠色）的IF染色。C) 流式細(xì)胞術(shù)分析巨噬細(xì)胞極化情況。D) 用水凝膠處理第2天的RAW264.7細(xì)胞（LPS刺激后）中M1相關(guān)基因TNF-α、IL-1β和Cox2的相對(duì)mRNA表達(dá)。E) M2相關(guān)基因TGF-β1和IL-10的相對(duì)mRNA表達(dá)。 F）基于IF圖像的巨噬細(xì)胞CD86、CD206定量熒光強(qiáng)度及伸長(zhǎng)率的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。G）門(mén)控CD11b + F4/80 +細(xì)胞后M1細(xì)胞（CD86 + CD206- ）和M2細(xì)胞（CD86 - CD206 + ）的定量結(jié)果。H）用水凝膠處理第2天的RAW264.7（LPS刺激后）中促炎細(xì)胞因子TNF-α和IL-1β的ELISA分析。I）抗炎細(xì)胞因子TGF-β1和IL-10的ELISA分析

（5）轉(zhuǎn)錄組分析揭示MSL@Z/G水凝膠誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞極化途徑

為了探究MSL@Z/G水凝膠在巨噬細(xì)胞極化中的作用機(jī)制，對(duì)用LPS刺激的巨噬細(xì)胞與MSL@Z/G和Z/G水凝膠共培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行了RNA-seq轉(zhuǎn)錄組分析?；鹕綀D顯示，MSL@Z/G與Z/G組間有4514個(gè)上調(diào)基因和7567個(gè)下調(diào)基因，表明基因表達(dá)存在顯著差異（圖5A）?；虮倔w（GO）富集分析顯示，MSL@Z/G組減弱了炎癥反應(yīng)過(guò)程，導(dǎo)致炎癥因子表達(dá)降低，且增強(qiáng)了Notch信號(hào)通路，該通路是快速血運(yùn)重建和血管生成的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因素（圖5B、E）。KEGG富集圖顯示了與抗炎相關(guān)的功能注釋?zhuān)∟F-κB和TNF信號(hào)通路，且Notch信號(hào)通路在KEGG TOP 30中被鑒定，抑制這些炎癥通路可能有助于減少血管內(nèi)皮損傷，建立有利于血管再生的免疫微環(huán)境（圖5C）。歸一化熱圖分析顯示，MSL@Z/G處理后，與炎癥和趨化因子相關(guān)的基因表達(dá)顯著下調(diào)，而Notch通路基因上調(diào)，這些基因與血管生成過(guò)程中的細(xì)胞遷移、增殖和存活有關(guān)（圖5D）。蛋白質(zhì)印跡試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，MSL@Z/G組的IκBα和IκBβ熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，NF-κB、IL-1β、TNF-α和Cox2的熒光強(qiáng)度降低（圖5F、G）?？傊?，二甲雙胍/Sr離子/NO聯(lián)合應(yīng)用可以抑制IκB的降解，從而降低NF-κB活化和隨后炎癥因子的分泌，有助于健康的內(nèi)皮功能和組織愈合（圖5H）。

圖5. MSL@Z/G水凝膠上巨噬細(xì)胞基因表達(dá)的生物信息學(xué)分析。A）差異表達(dá)基因轉(zhuǎn)錄組分析火山圖。B）MSL@Z/G與Z/G培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞所有基因的GO分析。C）MSL@Z/G與Z/G的KEGG富集通路。D）NF-κB、TNF和Notch信號(hào)通路差異表達(dá)基因熱圖。E）GO term GSEA。F）IκBα、IκBβ、NF-κB、IL-1β、TNF-α和Cox2蛋白表達(dá)的Western印跡圖像。（G）基于Western印跡圖像的蛋白質(zhì)表達(dá)定量分析。H）MSL@Z/G水凝膠抑制NF-κB信號(hào)通路示意圖

（6）MSL@Z/G水凝膠的體外細(xì)胞增殖和血管生成

為了研究MSL@Z/G水凝膠對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和血管生成的影響，首先評(píng)估了其在正常條件下對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）增殖的調(diào)控作用。Calcein-AM/PI染色結(jié)果顯示，MSL@Z/G水凝膠在24小時(shí)后具有良好的細(xì)胞相容性，且與對(duì)照組相比，MSL@Z/G組的細(xì)胞數(shù)量明顯增加，覆蓋面積更大（圖6A）。Cell Counting Kit-8（CCK8）結(jié)果表明，隨著時(shí)間推移，各組細(xì)胞增殖均增加，而SL@Z/G和MSL@Z/G組均加速了HUVECs的增殖，表明Sr離子和二甲雙胍的釋放對(duì)細(xì)胞增殖有積極影響（圖6E）。在氧化應(yīng)激條件下，通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)評(píng)估內(nèi)皮細(xì)胞的遷移能力，結(jié)果顯示，12小時(shí)后MSL@Z/G組的傷口愈合率明顯高于SL@Z/G組，24小時(shí)后MSL@Z/G組的劃痕完全閉合，這歸因于二甲雙胍、Sr和NO的釋放促進(jìn)了細(xì)胞遷移（圖6B、F）。Transwell實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了MSL@Z/G組的HUVEC遷移能力增強(qiáng)（圖6C）。此外，通過(guò)管道形成實(shí)驗(yàn)評(píng)估血管生成能力，結(jié)果顯示MSL@Z/G組形成的管道數(shù)量是Z/G組的兩倍多，表明其抗氧化作用有助于恢復(fù)糖尿病微環(huán)境中的血管生成（圖6D、G）。RT-PCR結(jié)果表明，MSL@Z/G組顯著上調(diào)了血管化相關(guān)基因的表達(dá)，包括HIF-1α、VEGF和eNOS，這與二甲雙胍刺激HIF-1α產(chǎn)生和Sr離子促進(jìn)VEGF誘導(dǎo)的血管生成一致（圖6H）。綜上所述，MSL@Z/G水凝膠通過(guò)持續(xù)釋放二甲雙胍和Sr離子，首先上調(diào)HIF-1α，進(jìn)而激活VEGF，隨后VEGF上調(diào)eNOS，產(chǎn)生內(nèi)源性NO，最終促進(jìn)大量VEGF的生成，加速再生血管中的血管生成，從而促進(jìn)皮瓣愈合（圖6I）。

圖6.MSL@Z/G水凝膠體外促進(jìn)HUVEC增殖和血管生成。A) 粘附于不同水凝膠表面24小時(shí)的HUVEC的活/死染色。B) 劃痕愈合實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)與水凝膠一起培養(yǎng)0至24小時(shí)的HUVEC的遷移情況。虛線表示劃痕邊緣。C) 與水凝膠一起培養(yǎng)的HUVEC 24小時(shí)Transwell遷移情況。D) 與水凝膠一起培養(yǎng)的HUVEC 6小時(shí)Matrigel管形成情況。E) 與水凝膠一起培養(yǎng)24、48和72小時(shí)的HUVEC的細(xì)胞增殖情況。F) 細(xì)胞遷移率量化。G) 節(jié)點(diǎn)和節(jié)段數(shù)量的量化。 H）用水凝膠處理第 7 天的 HUVEC 中血管生成基因 HIF-1α、VEGF 和 eNOS 的相對(duì) mRNA 表達(dá)。I）體外共培養(yǎng)體系和 MSL@Z/G 水凝膠刺激的 HUVEC 血管生成示意圖

圖7.MSL@Z/G水凝膠提高糖尿病大鼠多區(qū)域穿支皮瓣成活率。A）建立2型糖尿病及多區(qū)域穿支皮瓣大鼠模型。B）多區(qū)域穿支皮瓣皮膚血管活體解剖圖。TD：胸背穿支（解剖區(qū)）；IC：肋間后穿支（動(dòng)力區(qū)）；IL：髂腰穿支（潛在區(qū)）；×：切斷結(jié)扎；Choke I區(qū)：TD與IC之間；Choke II區(qū)：IC與IL之間。C）術(shù)后第0、1、3、7天的皮瓣圖像及激光散斑圖像。比例尺：2cm。D）基于激光散斑圖像的皮瓣Choke II區(qū)血液灌注情況。 E）術(shù)后第7天，對(duì)皮瓣Choke II區(qū)進(jìn)行H&E染色和Masson染色。比例尺：低倍鏡下1毫米，高倍鏡下200微米

（8）MSL@Z/G水凝膠的體內(nèi)血管生成和抗炎作用

免疫熒光（IF）和免疫組織化學(xué)（IHC）分析用于研究水凝膠在多區(qū)域穿支皮瓣中的血管生成和炎癥反應(yīng)。ROS IF染色證明了SL@Z/G和MSL@Z/G水凝膠的過(guò)氧化物清除能力，而NO IF染色證實(shí)了其釋放L-Arg以在體內(nèi)遞送NO的能力（圖8A、D）。術(shù)后第7天，對(duì)照組TNF-α陽(yáng)性表達(dá)最高，而IL-10陽(yáng)性表達(dá)最低，提示以M1型巨噬細(xì)胞為主；MSL@Z/G組TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞密度最低，而IL-10陽(yáng)性細(xì)胞密度最高，表明其促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M2表型極化，減輕炎癥反應(yīng)（圖8B、E）。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示，SL@Z/G和MSL@Z/G組的M2巨噬細(xì)胞比例明顯高于對(duì)照組和Z/G組，而M1巨噬細(xì)胞比例明顯低于對(duì)照組和Z/G組，與體外結(jié)果一致（圖8F、H）。CD31和Ang-1的IF染色顯示，MSL@Z/G組的微血管更大且更清晰，CD31和Ang-1陽(yáng)性細(xì)胞面積大于其他組，表明其促進(jìn)血管成熟（圖8C、G）。IHC染色顯示，MSL@Z/G組的MMP-2和MMP-9濃度最低，表明其減少M(fèi)MP蓄積，促進(jìn)皮瓣愈合（圖8I）。綜上所述，MSL@Z/G水凝膠在皮瓣抗氧化和抗炎方面發(fā)揮積極作用，改善糖尿病微環(huán)境以促進(jìn)血管新生（圖8J）。

圖8.MSL@Z/G 水凝膠增強(qiáng)糖尿病大鼠多區(qū)域穿支皮瓣 Choke II 區(qū)的血管生成和抗炎作用。A) 術(shù)后第 3 天，Choke II 區(qū)中的細(xì)胞核、ROS（紅色）和 NO（綠色）的 IF 染色。B) 術(shù)后第 3 天，Choke II 區(qū)中的細(xì)胞核、TNF-α（紅色）和 IL-10（綠色）的 IF 染色。C) 術(shù)后第 7 天，Choke II 區(qū)中的細(xì)胞核、CD31（紅色）和 Ang-1（綠色）的 IF 染色。D) 基于 IF 圖像的 ROS 和 NO 定量熒光區(qū)域。(E) 基于 IF 圖像的 TNF-α 和 IL-10 定量熒光區(qū)域。F) 在 CD11b ⁺ F4/80 ⁺細(xì)胞上門(mén)控后，M1（CD86 ⁺ CD206 ^?）和 M2（CD86 ^? CD206 ⁺ ）細(xì)胞的定量結(jié)果。G) 基于 IF 圖像的 CD31 和 Ang-1 的定量熒光區(qū)域。H) 代表性流式細(xì)胞術(shù)圖顯示術(shù)后第 7 天 Choke II 區(qū)周?chē)木奘杉?xì)胞極化。I) 術(shù)后第 7 天在 Choke II 區(qū)對(duì) MMP-9、HIF-1α、VEGF 和 eNOS 進(jìn)行 IHC 染色。J) MSL@Z/G 水凝膠改善糖尿病微環(huán)境以促進(jìn)皮瓣成活的示意圖