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針對上述問題復(fù)旦大學(xué)陳峰/同濟(jì)大學(xué)趙新宇、鄭龍坡教授設(shè)計了一種多功能可溶性微針貼片，利用聚谷氨酸（γ-PGA）作為基質(zhì)，負(fù)載槲皮素（Qu）修飾的Mg-Zn層狀氫氧化物鹽（LHS）納米片，通過微針穿透口腔黏膜，實現(xiàn)藥物的透皮傳遞，從而調(diào)節(jié)傷口微環(huán)境，促進(jìn)潰瘍愈合。該文章于2025年02月11日以《Polyphenol-Modified Mg?Zn Layered Hydroxide-Contained Microneedle Patch Enhance Mucosal Repair by Remolding Diabetic Oral Microenvironment》為題發(fā)表于《Advanced Healthcare Materials》（DOI：10.1002/adhm.202403883）。

LHSQ-MN微針貼片設(shè)計及作用示意圖

（1）LHSQ的合成與表征

（2）LHSQ-MN的合成與表征

（3）LHSQ-MN的體外抗菌性能

圖3a的平板計數(shù)法結(jié)果顯示，LHSQ-MN貼片對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和變異鏈球菌均表現(xiàn)出顯著的抗菌效果，抗菌率分別為97.5%、98.2%和93.1%。圖3b-d的定量統(tǒng)計進(jìn)一步證實了LHSQ-MN貼片對這三種細(xì)菌的高效抗菌活性。圖3e的SEM圖像顯示，與對照組相比，LHSQ-MN處理后的細(xì)菌細(xì)胞膜出現(xiàn)明顯的破裂和損傷，表明其通過破壞細(xì)菌細(xì)胞膜來實現(xiàn)抗菌效果。這些結(jié)果表明，LHSQ-MN貼片具有廣譜抗菌性，能夠有效抑制口腔潰瘍中的細(xì)菌感染。

（4）不同MN貼片的毒性、增殖、遷移和血管生成

圖4a-b的細(xì)胞增殖實驗結(jié)果顯示，LHSQ-MN貼片對HUVEC和HOK細(xì)胞的增殖具有顯著促進(jìn)作用，且LHSQ-MN組的增殖能力優(yōu)于LHS-MN組。圖4c-d的劃痕實驗表明，LHSQ-MN貼片能夠顯著促進(jìn)HUVEC細(xì)胞的遷移，剩余劃痕面積分別為原始面積的24.8%和31.1%。圖4e-f的Transwell實驗進(jìn)一步證實了LHSQ-MN貼片對HUVEC細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用。圖4g-h的血管生成實驗顯示，LHSQ-MN組形成了更多的管狀結(jié)構(gòu)，表明其具有良好的血管生成能力。

（5）體外抗氧化特性

與不同濃度LHSQ孵育，ABTS自由基清除在734 nm處有UV吸光度（圖5a），濃度為60μg/ mL 時，清除效率高達(dá)63.7%（圖5d）；DPPH自由基在525 nm附近有明顯的紫外吸收峰（圖5b），清除效率在60μg/ mL時達(dá)到71.7%（圖5e）；LHSQ對?OH的清除效率隨其濃度的增加而增加，在濃度為60 μg/ mL時達(dá)到峰值69.1%(圖5c，5f）。圖5g-h，細(xì)胞內(nèi)ROS水平檢測結(jié)果顯示，LHSQ-MN處理組的HOK細(xì)胞內(nèi)ROS水平顯著降低，接近正常細(xì)胞狀態(tài)，表明LHSQ-MN能夠有效減輕氧化應(yīng)激。

（6）糖尿病口腔潰瘍創(chuàng)面的體內(nèi)愈合

圖6a通過70%冰醋酸誘導(dǎo)大鼠口腔潰瘍模型，LHS-MN和LHSQ-MN貼片作為實驗組，商業(yè)西瓜霜（WF）作為陽性對照組，未處理組作為陰性對照組。圖6b-d顯示了治療6天內(nèi)潰瘍面積的變化，LHSQ-MN組的潰瘍愈合率在第4天達(dá)到73.9%，第6天達(dá)到97.3%，顯著高于WF組和未處理組。圖6e-h的HE和Masson染色結(jié)果顯示，LHSQ-MN組在第3天和第6天的組織學(xué)評價中，炎癥細(xì)胞減少，潰瘍面積縮小，第6天幾乎完全再生上皮和有序的膠原纖維。

圖5 LHSQ在清除自由基和ROS方面的抗氧化特性。（a-f）不同濃度LHSQ對不同自由基的吸收曲線和清除能力；（g）HOK中ROS水平的熒光照片；（h）細(xì)胞內(nèi)ROS水平的定量分析

（7）組織學(xué)評價抗炎、再生粘膜、成血管細(xì)胞和巨噬細(xì)胞極化的評估

圖7a的免疫組化染色結(jié)果顯示，LHSQ-MN組在第6天的再生口腔黏膜中，角蛋白（CK13）的表達(dá)顯著增加，表明上皮再生完全覆蓋。圖7b和c的免疫組化分析顯示，LHSQ-MN組在第3天的IL-10表達(dá)顯著增加，而TNF-α表達(dá)顯著降低，表明其具有顯著的抗炎效果。圖7d的免疫熒光染色顯示，LHSQ-MN組在第6天的CD31陽性新血管生成顯著增加，表明其促進(jìn)了血管生成。圖7e的免疫熒光分析顯示，LHSQ-MN組在第3天的M2巨噬細(xì)胞（Arg-1陽性）顯著增加，而M1巨噬細(xì)胞（iNOS陽性）顯著減少，表明其能夠調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化，減少炎癥反應(yīng)。圖7f-h的定量分析進(jìn)一步證實了這些結(jié)果，表明LHSQ-MN貼片在治療糖尿病口腔潰瘍方面具有顯著的療效。