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【研究背景】

脊髓損傷（SCI）常導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)障礙或癱瘓，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。SCI的病理過程分為原發(fā)性和繼發(fā)性損傷，繼發(fā)性損傷包括炎癥反應(yīng)和神經(jīng)再生。繼發(fā)性損傷可逆且持續(xù)數(shù)周至數(shù)月，提供治療窗口，但脊髓損傷后血脊髓屏障迅速恢復(fù)，治療窗口極短。目前，唯一公認(rèn)的治療方法是在損傷后8小時(shí)內(nèi)使用大劑量糖皮質(zhì)激素，但副作用較大。生物活性材料移植作為潛在治療方法，存在進(jìn)一步損傷或感染的風(fēng)險(xiǎn)。因此，開發(fā)有效的微創(chuàng)藥物治療方法仍是挑戰(zhàn)。內(nèi)源性刺激響應(yīng)納米粒子（智能納米粒子）能響應(yīng)病理微環(huán)境變化，在SCI中通過自我調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)微創(chuàng)藥物輸送。SCI的病理微環(huán)境中，炎癥和活性氧（ROS）引發(fā)膠質(zhì)瘢痕和神經(jīng)凋亡，抑制再生。盡管缺乏準(zhǔn)確的治療時(shí)機(jī)，但ROS水平和炎癥因子為智能納米粒子藥物輸送提供了機(jī)會(huì)。這些納米粒子能適應(yīng)病理環(huán)境，向靶細(xì)胞釋放所需藥物，是SCI治療的有前景方法。

針對(duì)上述問題，中國(guó)解放軍總醫(yī)院張雪松教授團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一種微環(huán)境自適應(yīng)納米粒子，采用聚（乳酸-乙醇酸）（PLGA）作為藥物載體，便于大規(guī)模載藥。通過功能化透明質(zhì)酸（HA）和使用延長(zhǎng)的Se-Se修飾聚乙二醇（PEG）鏈（RHNP），將RVG29間接連接到納米粒子上。研究表明，RVG29提高了納米粒子在血脊髓屏障（BSCB）中的滲透性。在早期階段，RVG29-PEG鏈在ROS作用下脫落，露出HA，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞的內(nèi)化；在晚期，RVG29促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞攝取。隨著BSCB修復(fù)和再生進(jìn)程，RHNP通過Se-Se響應(yīng)ROS動(dòng)態(tài)調(diào)整細(xì)胞靶向和攝取，實(shí)現(xiàn)自適應(yīng)。最后，使用具有抗炎、抗氧化和神經(jīng)再生作用的姜黃素（Cur），通過系統(tǒng)應(yīng)用RHNP-Cur在創(chuàng)傷性脊髓損傷模型中觀察到運(yùn)動(dòng)功能部分恢復(fù)，這通過抑制免疫細(xì)胞浸潤(rùn)和促進(jìn)神經(jīng)保護(hù)來實(shí)現(xiàn)。該文章于2024年10月31日以“Microenvironment Self-Adaptive Nanomedicine Promotes Spinal Cord Repair by Suppressing Inflammation Cascade and Neural Apoptosis”為題發(fā)表于《Advanced Materials》（DOI：10.1002/adma.202307624）。

圖1. RHNP-Cur 納米粒子的合成及其治療 SCI 的機(jī)制。 (a) RHNP-Cur 納米粒子示意圖和使用納米沉淀法合成 RHNP-Cur 的程序； (b) RHNP-Cur 在不同病理階段治療 SCI 的機(jī)制示意圖； (c) 示意圖闡明了 RHNP-Cur 在自適應(yīng)過程中的機(jī)制，靶向細(xì)胞并穿過 BSCB

（1） RHNP的合成與表征

       以PLGA-Se-Se-PEG-RVG29 和 PLGA-HA比例為1:1制備納米膠束RHNP，成功制備了直徑為84 nm、表面電荷為?16 mV的球形RHNP。暴露于H₂O₂后，RHNP的尺寸增大，透射電子顯微鏡顯示納米顆粒粘附，表明RVG29修飾對(duì)RHNP穩(wěn)定性至關(guān)重要。作為對(duì)照，制備了缺少Se─Se鍵、尺寸和表面電荷與RHNP相似的i-RHNP。RHNP和i-RHNP溶液的RVG29修飾濃度相當(dāng)。為了評(píng)估RHNP對(duì)H₂O₂的響應(yīng)能力，該研究團(tuán)隊(duì)將熒光標(biāo)簽FAM與RVG29偶聯(lián)，結(jié)果表明，暴露于100 μM H₂O₂后，F(xiàn)AM信號(hào)在約10分鐘后減弱。RHNP的表面電荷略微增加至?21.82 mV，而i-RHNP的尺寸和表面電荷不變。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明，暴露于H₂O₂后，RHNP中的Cy5.5信號(hào)逐漸增強(qiáng)，而i-RHNP中沒有，表明PEG-RVG29分離和HA暴露。BCA試劑盒檢測(cè)也顯示相同趨勢(shì)。能量色散X射線光譜分析顯示RHNP表面氧元素為30.83%，RVG29為21.07%；而在暴露H₂O₂后，RHNP的表面氧含量增至45.95%，與HA接近，S和Se含量顯著下降，表明RVG29消失并暴露HA。

圖2. 微環(huán)境自適應(yīng)納米粒子（RHNP）的合成與表征。 (a) RHNP 和用 100 μM H₂O₂ 處理的 RHNP 的尺寸和形貌。比例尺為 100 nm； (b) 用 100 μM H₂O₂ 處理的 i-RHNP 和 i-RHNP 的尺寸和形貌； (c) BCA 分析中 RHNP 和 i-RHNP 納米粒子溶液（4 mg mL?1）的蛋白質(zhì)濃度； (d) RHNP（用 FAM 修飾的 RVG29）對(duì) H₂O₂ 刺激的響應(yīng)示意圖； (e) 用 H₂O₂（100 μM）處理不同時(shí)間后 RHNP 的 FAM 熒光強(qiáng)度； (f) 用或不用 100 μM H₂O₂ 預(yù)處理的 RHNP 和 i-RHNP 的 Zeta 電位分析，n = 3； (g) RHNP 或 i-RHNP（用 BHQ3 修飾的 RVG29，用 Cy5.5 標(biāo)記的 HA對(duì) H₂O₂ 刺激作出反應(yīng)的示意圖； (h) 用 H₂O₂（100 μM）處理不同時(shí)間后 RHNP 和 i-RHNP 的 Cy5.5 熒光強(qiáng)度； (i) BCA 分析中 RHNP、用 PBS 和 100 μM H₂O₂ 處理的 i-RHNP 的透析液蛋白濃度； (j, k) RHNP (j) 和用 100 μM H2O2 (k) 處理的 RHNP 的能量色散 X 射線光譜（EDS）光譜

（2）RHNP 的體外研究

該研究團(tuán)隊(duì)通過體外實(shí)驗(yàn)研究了RHNP的自適應(yīng)能力。與HNP-Cy5.5和RHNP-Cy5.5+RVG29相比，RHNP-Cy5.5對(duì)bEnd.3內(nèi)皮細(xì)胞的親和力和滲透性顯著增強(qiáng)，增強(qiáng)效果歸因于RVG29肽的存在。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在氧化應(yīng)激條件下，RHNP在BV2小膠質(zhì)細(xì)胞和HT22神經(jīng)元細(xì)胞中的攝取增加，尤其是在H?O?預(yù)處理后。免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)分析表明，未脫落RVG29的RHNP組內(nèi)吞效率較低，說明RVG29的脫落有助于HA的暴露，促進(jìn)細(xì)胞攝取。在Raw264.7細(xì)胞中也觀察到類似現(xiàn)象。此外，RVG29修飾顯著促進(jìn)了SH-SY5Y細(xì)胞對(duì)納米粒子的攝取?？偟膩碚f，RVG29修飾對(duì)RHNP在神經(jīng)細(xì)胞中的內(nèi)化至關(guān)重要。

圖3. 微環(huán)境自適應(yīng)納米粒子 (RHNP) 的體外研究。 (a, b) 與 Cy5.5、HNP-Cy5.5、RHNP-Cy5.5 或 RHNP-Cy5.5 與 RVG29 一起孵育后的 bEnd.3 單層和基底外側(cè)室的熒光圖像； (c) 用 RHNP-Cy5.5（用 100 μM H?O? 預(yù)處理 10 分鐘）處理 4 小時(shí)的 BV2（用 100 ng mL?1 LPS 預(yù)處理 24 小時(shí)）的代表性共聚焦圖像。例尺分別為 100 μm 和 50 μm（放大）； (d, e) 使用流式細(xì)胞術(shù)分析 (d) 和定量分析 (e) 在 BV2 細(xì)胞中評(píng)估 RHNP-Cy5.5 的細(xì)胞靶向性，在之前在 (c) 中描述的相同刺激下進(jìn)行； (f) 用 HNP-Cy5.5、RHNP-Cy5.5 或 RHNP-Cy5.5-H?O? 處理 4 小時(shí)的 HT22 細(xì)胞（以 MAP2 為特征，綠色）的代表性共聚焦圖像。比例尺分別為 100 和 50 μm（放大）； (g) 使用 ImageJ 1.43 量化 (f) 中 Cy5.5 的熒光密度（與 HNP 組相比的倍數(shù)變化）； (h, i) 使用流式細(xì)胞術(shù)分析 (h) 和定量分析 (i) 在 (f) 中先前描述的相同刺激下對(duì) HT22 細(xì)胞中含有 Cy5.5 的不同納米系統(tǒng)的細(xì)胞靶向性進(jìn)行評(píng)估

（3）RHNP 在 SCI 不同階段的體內(nèi)生物分布

受體外研究結(jié)果啟發(fā)，該研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步研究了RHNP在SCI小鼠體內(nèi)的生物分布。靜脈注射后，RHNP在SCI早期（7天）病變區(qū)域顯示最強(qiáng)的Cy5.5信號(hào)，明顯高于HNP和i-RHNP。該研究團(tuán)隊(duì)推測(cè)，在ROS作用下，RHNP的Se-Se鍵斷裂，暴露HA，促進(jìn)了小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的吸收。免疫熒光成像證實(shí)，RHNP顯示出明顯的脊髓浸潤(rùn)并與小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞（F4/80標(biāo)記）有較強(qiáng)親和力。受傷區(qū)域的神經(jīng)元未觀察到明顯的納米顆粒攝取，顯示RHNP對(duì)免疫細(xì)胞的精確靶向。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在SCI晚期，RHNP和i-RHNP在脊髓和受傷區(qū)域顯示強(qiáng)熒光信號(hào)，而HNP的滲透性較低。盡管星形膠質(zhì)細(xì)胞在損傷區(qū)域增生，但強(qiáng)烈的Cy5.5信號(hào)仍在修復(fù)中的神經(jīng)元（GAP43標(biāo)記）中被檢測(cè)到，顯示RHNP能夠適應(yīng)不同病理階段并靶向特定細(xì)胞群。該設(shè)計(jì)有望提高抗炎和神經(jīng)再生藥物的療效。

圖4. RHNP 在脊髓損傷不同階段的體內(nèi)生物分布。 (a) 脊髓損傷早期病理微環(huán)境示意圖； (b, c) 脊髓損傷后 7 天小鼠的脊髓 IVIS 熒光圖像，靜脈注射 HNP-Cy5.5、RHNP-Cy5.5 或 i-RHNP-Cy5.5 6 小時(shí)（b），并估算平均相對(duì)熒光（c）； (d, e) 脊髓損傷早期區(qū)域中 Cy5.5 和神經(jīng)元（以 MAP2 為特征）的代表性共聚焦圖像（d），以及 Cy5.5+ 神經(jīng)元比例的半定量分析（e）； (f, g) 脊髓損傷區(qū)域中 Cy5.5 和小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞（以 F4/80 為特征）的代表性共聚焦圖像（f），以及 Cy5.5+ 小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞比例的半定量分析（g）； (h) 脊髓損傷晚期病理微環(huán)境示意圖； (i, j) 脊髓損傷后 28 天小鼠的脊髓 IVIS 熒光圖像，靜脈注射 HNP-Cy5.5、RHNP-Cy5.5 或 i-RHNP-Cy5.5 6 小時(shí)（i），并估算平均相對(duì)熒光（j）； (k, l) 脊髓損傷區(qū)域晚期 Cy5.5 和星形膠質(zhì)細(xì)胞（以 GFAP 為特征）的代表性共聚焦圖像（k），以及 Cy5.5+ 星形膠質(zhì)細(xì)胞比例的半定量分析（l）。比例尺分別為 100 μm 和 33 μm（放大）； (m, n) 脊髓損傷區(qū)域修復(fù)過程中 Cy5.5 和神經(jīng)元（以 GAP43 為特征）的代表性共聚焦圖像（m），以及修復(fù)中的 Cy5.5+ 神經(jīng)元比例的半定量分析（n）

（4）RHNP-Cur 的特征及其在 SCI 模型中的療效

該團(tuán)隊(duì)將姜黃素包覆在RHNP中，得到球形RHNP-Cur納米藥物，尺寸為90.2 nm，表面電荷為-16.32 mV。暴露于100 μM H?O?后，RHNP-Cur的尺寸和表面電荷略增至103.2 nm和-23.44 mV，表現(xiàn)出與RHNP相似的行為。RHNP-Cur在PBS中穩(wěn)定一個(gè)月，包封率為85.5%。在不同溶液中的釋放曲線表明，在100 μM H?O?和模擬SCI的酸性環(huán)境下，姜黃素釋放加速，24小時(shí)內(nèi)釋放約90%。接著，在創(chuàng)傷性SCI小鼠模型中，RHNP-Cur治療顯著加速了組織修復(fù)，BMS評(píng)分顯示治療組在第7天后表現(xiàn)優(yōu)于對(duì)照組，并持續(xù)至14天。步態(tài)分析顯示，RHNP-Cur組小鼠恢復(fù)更快，運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性更好，H&E染色結(jié)果顯示治療組的病變面積明顯小于其他組。總之，RHNP-Cur有助于SCI后運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)。

圖5. RHNP-Cur 在創(chuàng)傷性脊髓損傷模型中的療效。 (a) 創(chuàng)傷性脊髓損傷模型中治療實(shí)驗(yàn)的時(shí)間線； (b) 脊髓挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)的 Basso 小鼠評(píng)分（BMS）； (c-e) 脊髓損傷后第 28 天進(jìn)行足跡分析的代表性圖像（c），以及后肢足跡的長(zhǎng)度（d）和寬度（e）定量分析。藍(lán)色為前肢足跡，紅色為后肢足跡； (f, g) 損傷后第 28 天各組的旋轉(zhuǎn)桿實(shí)驗(yàn)結(jié)果。小鼠被放置在旋轉(zhuǎn)桿上，旋轉(zhuǎn)速度從 0 加速到 40 rpm，記錄小鼠保持在旋轉(zhuǎn)桿上的時(shí)間（f）以及它們跌落的旋轉(zhuǎn)速度（g）。每只小鼠測(cè)試兩次； (h, i) 損傷后第 28 天脊髓冠狀切片的蘇木精-伊紅（H&E）染色圖像（h），以及損傷區(qū)域的定量分析（i）

（5）RHNP-Cur 增強(qiáng)脊髓損傷后的神經(jīng)再生并抑制炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)

脊髓損傷后，殘留神經(jīng)元通過再生軸突修復(fù)神經(jīng)連接。免疫熒光分析顯示，RHNP-Cur組和i-RHNP-Cur組表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)和軸突再生，前者有更多的NF200陽(yáng)性軸突。相比之下，PBS和RHNP組未見顯著再生，HNP-Cur組雖有再生，但較弱。RHNP-Cur有效促進(jìn)神經(jīng)再生，并在炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)中發(fā)揮作用，顯著抑制M1小膠質(zhì)細(xì)胞極化和星形膠質(zhì)細(xì)胞的瘢痕形成，減少神經(jīng)毒性A1星形膠質(zhì)細(xì)胞的分化。此外，RHNP-Cur顯著減少SCI病變區(qū)CSPG沉積，證明其減輕炎癥反應(yīng)。相比之下，姜黃素負(fù)載的脂質(zhì)體（脂質(zhì)體-Cur）在SCI治療中的效果不如RHNP-Cur，后者在長(zhǎng)期治療中表現(xiàn)更優(yōu)，表明脂質(zhì)體在靶向性和BSCB穿透方面有限制。

圖6.RHNP-Cur 抑制炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)并促進(jìn)脊髓損傷后的神經(jīng)修復(fù)。 (a-c) 脊髓損傷后第 28 天脊髓損傷區(qū)域神經(jīng)纖維（標(biāo)記為 NF200，紅色）和新生成神經(jīng)細(xì)胞（標(biāo)記為 GAP43，綠色）免疫熒光染色的代表性共聚焦圖像（a），以及 NF200 熒光強(qiáng)度的半定量分析（與 PBS 組的倍數(shù)變化）（b）和 GAP43 熒光強(qiáng)度的半定量分析（與 PBS 組的倍數(shù)變化）（c）。實(shí)線框劃定的區(qū)域在下方放大； (d-f) 損傷后第 7 天脊髓損傷區(qū)域小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞（標(biāo)記為 F4/80，紅色）和 M1 極化（標(biāo)記為 iNOS，綠色）的代表性共聚焦圖像（d），以及損傷區(qū)域小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù)（e）和 iNOS+ 小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞比例的半定量分析（f）； (g-i) 損傷后第 28 天脊髓損傷區(qū)域星形膠質(zhì)細(xì)胞（標(biāo)記為 GFAP，綠色）和神經(jīng)毒性 A1 極化（標(biāo)記為 C3，紅色）的代表性共聚焦圖像（g），以及 GFAP 熒光強(qiáng)度的半定量分析（與 PBS 組的倍數(shù)變化）（h）和損傷區(qū)域 C3+ 星形膠質(zhì)細(xì)胞比例的半定量分析（i）

（6）RHNP-Cur抑制炎癥級(jí)聯(lián)的機(jī)制

為評(píng)估RHNP-Cur對(duì)炎癥級(jí)聯(lián)的影響，該研究團(tuán)隊(duì)建立了bEnd.3細(xì)胞、極化BV2細(xì)胞和原代星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外共培養(yǎng)模型。RHNP-Cur能夠穿越BSCB，顯著抑制LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞M1極化，并減少iNOS熒光信號(hào)。ELISA結(jié)果顯示，RHNP-Cur有效降低了BV2上清液中的炎癥因子水平（如TNF-α、IL-6等），進(jìn)一步證實(shí)了其抗炎作用。與其他組相比，RHNP-Cur的效果最為顯著。HNP-Cur因無法穿透內(nèi)皮細(xì)胞屏障，其抗炎作用受限；i-RHNP-Cur則因RVG29的存在，導(dǎo)致內(nèi)化受阻，效果減弱。RHNP-Cur還顯著抑制了M1上清液誘導(dǎo)的A1星形膠質(zhì)細(xì)胞分化，減少了C3、TNF-α、IL-6、IL-1β的表達(dá)，并下調(diào)了磷酸化STAT3和C3蛋白水平?？傊琑HNP-Cur通過抑制M1小膠質(zhì)細(xì)胞極化和A1星形膠質(zhì)細(xì)胞分化，有效抑制了炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)。

圖7.RHNP-Cur 抑制炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的機(jī)制。 (a) 用于評(píng)估 RHNP-Cur 對(duì)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)作用的體外共培養(yǎng)模型示意圖。MCM，微膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)基； (b) BV2 細(xì)胞（用 iNOS 染色，紅色）在 LPS（100 ng mL?1）刺激下，與 PBS、HNP-Cur、RHNP-Cur、i-RHNP-Cur 和 RHNP 孵育 24 小時(shí)后，在基底外側(cè)室培養(yǎng)的代表性共聚焦圖像。額外的組別為不加任何刺激的對(duì)照組。細(xì)胞核用 DAPI（藍(lán)色）染色。比例尺為 100 μm； (c,d) 流式細(xì)胞術(shù)分析 CD86+ M1 型 BV2 細(xì)胞（c）以及定量分析（d），在 (b) 中描述的相同刺激下進(jìn)行； (e) 用 BV2 細(xì)胞培養(yǎng)上清液孵育 24 小時(shí)后的原代星形膠質(zhì)細(xì)胞（用 C3-紅色和 GFAP-綠色染色）的代表性共聚焦圖像； (f-h) 用 RT-qPCR 檢測(cè)神經(jīng)毒性 A1 型星形膠質(zhì)細(xì)胞中炎癥相關(guān)基因 TNF-α、IL-6 和 IL-1β 的 mRNA 表達(dá)水平（n = 3）； (i) 對(duì) A1 型星形膠質(zhì)細(xì)胞中的 C3、磷酸化的 Stat3（p-stat3）以及 Stat3 的 Western blot 分析； (j,k) C3 蛋白相對(duì)于 β-肌動(dòng)蛋白的半定量分析以及 p-stat3/stat3 的分析

（7）RHNP-Cur 保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受神經(jīng)毒性 A1 星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷的機(jī)制

為進(jìn)一步研究RHNP-Cur對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用，該研究團(tuán)隊(duì)建立了共培養(yǎng)模型，模擬神經(jīng)毒性A1星形膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)的HT22細(xì)胞凋亡。RHNP-Cur和i-RHNP-Cur顯著減少了細(xì)胞凋亡，TUNEL染色和流式細(xì)胞術(shù)分析均證實(shí)了這一點(diǎn)。蛋白質(zhì)印跡分析顯示，RHNP-Cur治療有效逆轉(zhuǎn)了ACM誘導(dǎo)的促凋亡蛋白Bax上調(diào)和抗凋亡蛋白Bcl-2下調(diào)。與其他組相比，HNP-Cur和游離RHNP未顯示顯著效果。總的來說，RHNP-Cur通過抑制炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)保護(hù)作用，表明其在SCI治療中具有關(guān)鍵作用。

圖8. RHNP-Cur 保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受神經(jīng)毒性 A1 型星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響的機(jī)制。 (a) 用于展示 RHNP-Cur 對(duì)神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用的體外共培養(yǎng)模型示意圖； (b,c) HT22 細(xì)胞（用 TUNEL 染色，綠色）在 ACM 孵育 24 小時(shí)后，與 PBS、HNP-Cur、RHNP-Cur、i-RHNP-Cur 和 RHNP 孵育的代表性圖像（b）及 TUNEL+ 細(xì)胞的定量分析（c）。TUNEL 染色用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡。另設(shè)無任何刺激的對(duì)照組。細(xì)胞核用 DAPI（藍(lán)色）染色。比例尺為 100 μm； (d,e) 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) HT22 細(xì)胞的凋亡率（Annexin V-FITC/PI 雙重染色）（d）及凋亡率定量分析（紅框圈出的區(qū)域），包括早期凋亡（FITC+PI+）和晚期凋亡（FITC+PI?）（e）； （f） HT22 細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白 Bcl-2 和 Bax 的 Western blot 分析； (g,h) Bax 和 Bcl-2 蛋白相對(duì)于 β-肌動(dòng)蛋白的半定量分析

【研究小結(jié)】

該研究團(tuán)隊(duì)成功開發(fā)了一種用于脊髓損傷藥物治療的微環(huán)境自適應(yīng)納米粒子。通過利用長(zhǎng)鏈 RVG29-PEG，該研究團(tuán)隊(duì)實(shí)現(xiàn)了對(duì)脊髓的靶向遞送，并在整個(gè)治療過程中增強(qiáng)了 BSCB 的滲透性。納米粒子對(duì)脊髓損傷早期病理微環(huán)境氧化應(yīng)激的響應(yīng)性，得益于 Se-Se 的敏感性，使長(zhǎng)鏈 RVG29-PEG 脫落，短鏈 HA 暴露，促進(jìn)免疫細(xì)胞的吸收。相反，在脊髓損傷晚期，完整的納米粒子結(jié)構(gòu)促進(jìn)了神經(jīng)元的內(nèi)化。此外，將姜黃素封裝在刺激響應(yīng)納米粒子中，作為一種微環(huán)境自適應(yīng)或“智能”納米藥物，可有效促進(jìn)脊髓損傷后的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)。這是通過抑制炎癥級(jí)聯(lián)和保護(hù)神經(jīng)再生免受炎癥誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡而實(shí)現(xiàn)的。該研究團(tuán)隊(duì)的納米藥物的多功能性作為一種安全、有效且對(duì)患者友好的綜合 SCI 治療策略具有重大前景。